賽默飛分光光度計(jì)BioMate 160實(shí)驗(yàn)設(shè)置

一、前言

BioMate 160是賽默飛公司推出的一款高性能紫外-可見分光光度計(jì)，具有波長范圍廣、檢測靈敏度高、操作便捷等優(yōu)勢。儀器不僅能滿足常規(guī)吸光度和透過率的測定，還能實(shí)現(xiàn)DNA/RNA濃度檢測、蛋白分析、動(dòng)力學(xué)反應(yīng)監(jiān)測和多組分定量分析等應(yīng)用。要獲得準(zhǔn)確可靠的結(jié)果，科學(xué)合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)置至關(guān)重要。

二、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備設(shè)置

1. 環(huán)境條件

• 溫度控制：實(shí)驗(yàn)室溫度保持在20~25℃，避免劇烈波動(dòng)。

• 濕度要求：相對(duì)濕度控制在60%以下，防止光學(xué)系統(tǒng)受潮。

• 光照條件：遠(yuǎn)離強(qiáng)光直射，避免外部光干擾檢測。

• 防震措施：儀器應(yīng)放置在穩(wěn)定臺(tái)面，避免震動(dòng)引起光路不穩(wěn)。

2. 電源檢查

• 電源電壓保持在220V±10%。

• 避免與大功率設(shè)備同一電源回路，減少電磁干擾。

3. 儀器開機(jī)與預(yù)熱

• 打開電源后至少預(yù)熱15分鐘。

• 執(zhí)行自檢程序，確保光源、波長和檢測器正常。

4. 樣品與比色皿準(zhǔn)備

• 樣品需經(jīng)過適當(dāng)稀釋，保證吸光度在0.2~1.0之間。

• 紫外區(qū)使用石英比色皿，可見區(qū)使用光學(xué)玻璃比色皿。

• 比色皿透光面需潔凈、無水痕或指紋。

三、基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)設(shè)置

1. 波長設(shè)定

• 單波長測定：輸入目標(biāo)波長，如核酸測定常用260 nm。

• 多波長測定：輸入多個(gè)特征吸收峰波長，用于多組分分析。

• 掃描范圍：設(shè)定起止波長與步長，如200~800 nm，步長1 nm。

2. 模式選擇

• 吸光度模式（Abs）：適合溶液濃度與吸收峰強(qiáng)度的關(guān)系研究。

• 透過率模式（T%）：用于檢測光透過率。

• 濃度模式（Conc）：結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析。

• 動(dòng)力學(xué)模式（Kinetics）：實(shí)時(shí)監(jiān)測反應(yīng)過程。

3. 光源選擇

• 氘燈：適合200~350 nm紫外區(qū)。

• 鎢燈：適合350~800 nm可見區(qū)。

• 自動(dòng)切換：根據(jù)波長范圍由系統(tǒng)自動(dòng)切換。

4. 空白校正

• 使用溶劑作為空白，在設(shè)定波長下進(jìn)行零點(diǎn)校正。

• 保證測量數(shù)據(jù)排除了溶劑和比色皿吸收的影響。

四、實(shí)驗(yàn)設(shè)置的詳細(xì)流程

1. DNA/RNA檢測實(shí)驗(yàn)設(shè)置

• 波長選擇：260 nm（核酸）、280 nm（蛋白）、230 nm（有機(jī)物雜質(zhì)）。

• 計(jì)算方式：儀器自動(dòng)給出260/280比值和260/230比值。

• 樣品稀釋：確保A260值在0.2~1.0范圍內(nèi)。

• 保存格式：數(shù)據(jù)可導(dǎo)出為CSV或圖形曲線。

2. 蛋白濃度測定實(shí)驗(yàn)設(shè)置

• 常用方法：考馬斯亮藍(lán)法、Lowry法、雙縮脲法。

• 波長設(shè)定：一般選擇595 nm（考馬斯亮藍(lán)法）。

• 標(biāo)準(zhǔn)曲線設(shè)置：輸入標(biāo)準(zhǔn)品濃度與對(duì)應(yīng)吸光度，建立曲線。

• 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理：自動(dòng)計(jì)算樣品濃度。

3. 動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)置

• 測量間隔：根據(jù)反應(yīng)速度設(shè)定，如每隔10秒采集一次。

• 測量時(shí)間：可設(shè)定幾分鐘到幾小時(shí)。

• 溫控條件：若配有溫控附件，可保持恒溫。

• 輸出結(jié)果：儀器實(shí)時(shí)繪制曲線，輸出速率常數(shù)等數(shù)據(jù)。

4. 波長掃描實(shí)驗(yàn)設(shè)置

• 掃描范圍：如200~800 nm。

• 步長選擇：1 nm或更小。

• 掃描速度：快速掃描用于樣品預(yù)覽，慢速掃描提高分辨率。

• 結(jié)果輸出：生成光譜曲線，可用于峰值位置和形狀分析。

5. 多組分定量實(shí)驗(yàn)設(shè)置

• 波長選擇：輸入各組分特征波長。

• 矩陣輸入：預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度矩陣。

• 自動(dòng)計(jì)算：儀器通過線性代數(shù)方法分離不同組分濃度。

五、數(shù)據(jù)保存與導(dǎo)出設(shè)置

1. 存儲(chǔ)方式

• 內(nèi)部存儲(chǔ)：適合短期保存。

• U盤導(dǎo)出：適合長期保存和后期分析。

2. 文件命名規(guī)范

• 格式示例：20250818_SampleA_DNA260nm

• 包含日期、樣品編號(hào)和實(shí)驗(yàn)類型，方便溯源。

3. 輸出文件類型

• 數(shù)據(jù)文件：CSV格式，便于統(tǒng)計(jì)軟件處理。

• 圖像文件：JPG或PDF，用于報(bào)告和展示。

六、實(shí)驗(yàn)設(shè)置中的注意事項(xiàng)

1. 比色皿方向一致：始終保持一致的放置方向，避免光程差異。

2. 避免氣泡干擾：上樣時(shí)注意排除氣泡。

3. 樣品混勻：測量前需充分混勻，避免分層。

4. 樣品濃度控制：吸光度超過1.5需稀釋后再測。

5. 重復(fù)性驗(yàn)證：重要樣品至少測三次，取平均值。

七、常見誤差與調(diào)整設(shè)置

1. 基線漂移：應(yīng)延長預(yù)熱時(shí)間或檢查光源。

2. 波長偏移：通過標(biāo)準(zhǔn)濾光片校準(zhǔn)波長。

3. 吸光度不穩(wěn)定：檢查比色皿是否清潔或是否有氣泡。

4. 信號(hào)噪音大：檢查環(huán)境是否有電磁干擾。

八、實(shí)驗(yàn)后設(shè)置與關(guān)機(jī)

1. 退出程序：完成實(shí)驗(yàn)后退出當(dāng)前測量模式。

2. 數(shù)據(jù)備份：確認(rèn)數(shù)據(jù)已保存至外部存儲(chǔ)。

3. 光源關(guān)閉：若無實(shí)驗(yàn)需立即關(guān)機(jī)，延長光源壽命。

4. 比色皿清理：用去離子水沖洗干凈，擦干保存。

九、良好實(shí)驗(yàn)設(shè)置習(xí)慣的重要性

合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)置不僅保證了數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性，還能提升實(shí)驗(yàn)效率，避免重復(fù)操作帶來的資源浪費(fèi)。同時(shí)，良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)置習(xí)慣也能減少人為誤差，讓BioMate 160的性能得到充分發(fā)揮。

十、總結(jié)

賽默飛BioMate 160分光光度計(jì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)置涵蓋了環(huán)境條件、電源檢查、波長選擇、模式設(shè)定、空白校正、標(biāo)準(zhǔn)曲線建立、數(shù)據(jù)保存及誤差調(diào)整等多個(gè)方面。不同實(shí)驗(yàn)類型需要不同的設(shè)置方案，但核心原則始終是標(biāo)準(zhǔn)化、精確化和規(guī)范化。實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)在日常操作中不斷積累經(jīng)驗(yàn)，形成適合自身研究方向的設(shè)置模板，從而在科研與檢測工作中取得高效、可靠的成果。