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質(zhì)保3年只換不修，廠家長(zhǎng)沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司。
羅氏實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是一款基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)的高精度核酸檢測(cè)設(shè)備。它通過熒光信號(hào)的實(shí)時(shí)采集與分析，實(shí)現(xiàn)DNA或RNA擴(kuò)增過程的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。與傳統(tǒng)PCR不同，實(shí)時(shí)熒光定量PCR不僅能判斷目標(biāo)序列是否存在，還能對(duì)其初始拷貝數(shù)進(jìn)行精確定量，廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)、分子生物學(xué)研究等領(lǐng)域。
該儀器采用高性能光學(xué)系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)及智能化操作軟件，能夠在短時(shí)間內(nèi)完成多通道、多樣本的同步檢測(cè)，具備高靈敏度、高重復(fù)性和穩(wěn)定性，是科研與臨床實(shí)驗(yàn)室常用的核心設(shè)備之一。
在進(jìn)行開機(jī)操作前，必須完成一系列準(zhǔn)備工作，以確保儀器處于良好運(yùn)行狀態(tài)：
環(huán)境要求
實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)保持在18℃至28℃之間，相對(duì)濕度不超過70%。
儀器應(yīng)放置在穩(wěn)固、平整、防震的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，遠(yuǎn)離強(qiáng)磁場(chǎng)和陽(yáng)光直射。
避免與高功率電器（如離心機(jī)、電熱設(shè)備）共用電源插座，以防干擾信號(hào)。
電源與接地
使用符合儀器要求的穩(wěn)壓電源，電壓波動(dòng)不應(yīng)超過±10%。
確保接地良好，接地電阻小于4Ω，以防止靜電干擾或電壓突變。
儀器檢查
檢查電源線、通訊線、熒光燈模塊及光纖接口是否連接牢固。
觀察儀器內(nèi)部是否清潔，無積塵、液體殘留或異物。
樣品槽、反應(yīng)板及耗材區(qū)域應(yīng)干凈、干燥。
計(jì)算機(jī)及軟件準(zhǔn)備
連接PCR儀與專用計(jì)算機(jī)，通過USB或局域網(wǎng)接口。
打開控制軟件，檢查驅(qū)動(dòng)是否正常加載。
檢查上次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是否已保存完畢，確保存儲(chǔ)空間充足。
通電啟動(dòng)
插上電源線，確認(rèn)電源指示燈亮起。
按下主機(jī)電源鍵，儀器開始自檢。
自檢過程中，系統(tǒng)會(huì)檢測(cè)溫控模塊、光學(xué)模塊、風(fēng)扇及數(shù)據(jù)連接狀態(tài)。若有異常，顯示屏?xí)崾惧e(cuò)誤代碼，應(yīng)根據(jù)說明書排查。
軟件啟動(dòng)
自檢完成后，在計(jì)算機(jī)上雙擊“PCR控制系統(tǒng)”圖標(biāo)啟動(dòng)軟件。
軟件會(huì)自動(dòng)識(shí)別連接的儀器型號(hào)、序列號(hào)及運(yùn)行狀態(tài)。
檢查軟件主界面溫控系統(tǒng)、光路系統(tǒng)狀態(tài)是否顯示為“正?！?。
若首次使用，應(yīng)登錄管理員賬戶完成系統(tǒng)初始化設(shè)定。
溫控系統(tǒng)預(yù)熱
在主界面中點(diǎn)擊“溫控啟動(dòng)”，系統(tǒng)將自動(dòng)預(yù)熱至默認(rèn)溫度。
一般情況下，反應(yīng)模塊溫度穩(wěn)定后，主界面顯示“Ready”。
預(yù)熱時(shí)間約為10-15分鐘，期間可準(zhǔn)備樣品。
熒光燈模塊檢查
打開光學(xué)測(cè)試功能，檢查每個(gè)通道的激發(fā)光與發(fā)射光是否正常。
若某通道信號(hào)偏弱，可清潔光路鏡片或更換濾光片。
確保光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)靈敏、無噪聲干擾。
反應(yīng)體系配制
根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，配制PCR反應(yīng)體系，包括模板、引物、探針、酶混合液及熒光染料。
嚴(yán)格按照說明書比例操作，避免氣泡產(chǎn)生。
樣品應(yīng)在冰上操作，以減少酶活性變化。
加樣與封板
將反應(yīng)液分裝至PCR反應(yīng)管或96孔反應(yīng)板中。
檢查每孔體積一致性，避免液面高低差異。
使用專用封板膜密封，防止蒸發(fā)與交叉污染。
將反應(yīng)板置入儀器樣品槽中，注意定位方向正確。
新建實(shí)驗(yàn)文件
在軟件中點(diǎn)擊“新建實(shí)驗(yàn)”，輸入實(shí)驗(yàn)名稱、日期及操作者信息。
選擇反應(yīng)體系類型（如SYBR Green或TaqMan探針法）。
設(shè)置熒光通道及參考染料。
溫度循環(huán)參數(shù)設(shè)定
輸入預(yù)變性、退火、延伸等階段的溫度與時(shí)間。
設(shè)置循環(huán)次數(shù)，一般為35-45次。
可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要調(diào)整升溫速率與熒光采集點(diǎn)。
數(shù)據(jù)采集設(shè)置
勾選實(shí)時(shí)熒光采集選項(xiàng)，選擇檢測(cè)通道。
設(shè)置閾值線及基線校正方式。
可啟用“熔解曲線分析”功能，用于產(chǎn)物特異性判斷。
啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)
點(diǎn)擊“運(yùn)行”按鈕，儀器開始反應(yīng)。
軟件界面實(shí)時(shí)顯示熒光曲線及溫度變化。
實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)勿隨意開蓋或斷電。
自動(dòng)保存與導(dǎo)出
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，軟件會(huì)自動(dòng)保存數(shù)據(jù)文件。
可導(dǎo)出為Excel、PDF或?qū)Ｓ酶袷竭M(jìn)行分析。
結(jié)果分析
查看擴(kuò)增曲線是否平滑、閾值交點(diǎn)是否明顯。
檢查標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系（R2≥0.99）。
根據(jù)Ct值計(jì)算樣品相對(duì)表達(dá)量或絕對(duì)拷貝數(shù)。
熔解曲線驗(yàn)證
觀察熔解峰形態(tài)是否單一，判斷擴(kuò)增產(chǎn)物特異性。
若出現(xiàn)多峰或拖尾，說明存在非特異性擴(kuò)增，應(yīng)優(yōu)化引物或退火溫度。
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后等待降溫
儀器會(huì)自動(dòng)降溫至安全溫度，一般為25℃以下。
不可強(qiáng)制關(guān)閉電源，以防損壞溫控系統(tǒng)。
退出軟件與斷電
關(guān)閉軟件并退出用戶賬戶。
關(guān)閉主機(jī)電源，再拔下電源線。
清潔與維護(hù)
使用無塵布擦拭儀器表面，保持干凈。
禁止使用有機(jī)溶劑清洗光學(xué)部件。
定期檢查風(fēng)扇與濾網(wǎng)，防止灰塵堆積。
每周保養(yǎng)
清理樣品槽及反應(yīng)孔周邊，保持無污染。
檢查熒光燈使用壽命，必要時(shí)更換。
每月檢測(cè)
使用標(biāo)準(zhǔn)模板進(jìn)行性能驗(yàn)證，確保擴(kuò)增效率穩(wěn)定。
檢查軟件版本，更新至最新穩(wěn)定版。
安全事項(xiàng)
不得在帶電狀態(tài)下插拔模塊。
實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)佩戴防護(hù)手套與護(hù)目鏡。
若發(fā)生異常聲響或溫度波動(dòng)，應(yīng)立即停止運(yùn)行并聯(lián)系廠家。
羅氏實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的開機(jī)流程看似簡(jiǎn)單，但每一步都對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。規(guī)范的操作不僅能延長(zhǎng)儀器壽命，更能保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的科學(xué)性與重復(fù)性。通過嚴(yán)格遵守開機(jī)、運(yùn)行與維護(hù)步驟，實(shí)驗(yàn)人員可最大限度地提升檢測(cè)效率，確保實(shí)驗(yàn)室的高質(zhì)量輸出。
杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
