伯樂電穿孔儀 165-2660 是一款高性能的細(xì)胞電穿孔與電轉(zhuǎn)化系統(tǒng),適用于真核細(xì)胞、原核細(xì)胞、酵母及植物原生質(zhì)體等多種體系。該設(shè)備通過高壓脈沖瞬時作用,使細(xì)胞膜產(chǎn)生可逆性微孔,從而實現(xiàn)外源 DNA、RNA 或蛋白分子的導(dǎo)入。
由于其工作原理基于高壓放電,操作中既涉及精密電子系統(tǒng),也包含強電場釋放過程,因此用戶在使用時必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)范與安全要求。正確的使用方法不僅能保障操作者人身安全,還能有效延長設(shè)備壽命、提高實驗重復(fù)性與成功率。
實驗臺必須平整、穩(wěn)固,遠(yuǎn)離震動源。
工作區(qū)域應(yīng)保持干燥、清潔,防止液體濺入設(shè)備。
室內(nèi)溫度保持在 20–25℃,濕度不超過 80%,避免冷凝。
設(shè)備周圍應(yīng)留有足夠散熱空間,后方和兩側(cè)各保持至少 20 cm 距離。
禁止在有腐蝕性氣體或易燃易爆環(huán)境中使用。
使用獨立接地的交流電源,電壓為 220V ±10%,頻率 50/60 Hz。
確保電源插座的接地線接觸良好,接地電阻小于 0.1 Ω。
嚴(yán)禁使用帶破損、老化或非原裝的電源線。
使用前確認(rèn)電源開關(guān)處于關(guān)閉狀態(tài),防止意外通電。
不得與大功率電器共用插座,避免電壓波動。
檢查主機、電擊槽、模塊和連接線是否完好。
確認(rèn)電擊杯清潔、無裂紋、無液體殘留。
檢查通風(fēng)口是否通暢,風(fēng)扇運行正常。
開機前確保 ShockPod 蓋處于閉合狀態(tài)。
若儀器長時間未使用,應(yīng)先空載運行 1–2 分鐘進(jìn)行自檢。
選用對數(shù)生長期的活性細(xì)胞,形態(tài)健康、無污染。
細(xì)胞濃度應(yīng)控制在 1×10?–1×10? cells/mL 范圍內(nèi)。
對哺乳動物細(xì)胞,操作前應(yīng)去除血清及高鹽培養(yǎng)基成分。
使用低離子強度緩沖液,避免鹽離子造成電弧。
緩沖液必須無菌、無蛋白污染,pH 維持在 7.0–7.5。
DNA、RNA 或蛋白質(zhì)應(yīng)純度高,濃度適中。
混合時輕輕顛倒均勻,避免產(chǎn)生氣泡。
使用前用無離子水沖洗干凈并晾干。
樣品體積不超過杯容量的 80%,防止溢出。
加樣后仔細(xì)檢查是否有氣泡,可輕輕敲擊杯壁去除。
若發(fā)現(xiàn)電極表面有劃痕或氧化,應(yīng)立即更換。
在斷電狀態(tài)下連接 CE 模塊或 PC 模塊。
插接時應(yīng)對準(zhǔn)方向并插緊,防止虛接。
模塊連接完成后再通電,系統(tǒng)會自動識別模塊類型。
不可在通電狀態(tài)下拔插任何模塊或電纜。
先選擇波形類型(指數(shù)衰減波或方波)。
再設(shè)置電壓、電容、電阻或脈沖時間。
設(shè)定值應(yīng)依據(jù)細(xì)胞類型及電擊間隙選擇,不可隨意增大電壓。
若不確定條件,應(yīng)從低電壓、短時間開始逐步優(yōu)化。
參數(shù)修改后必須按確認(rèn)鍵保存,方能執(zhí)行放電。
插入電擊杯后合上 ShockPod 蓋,系統(tǒng)檢測到蓋閉合后方可啟動。
按下“PULSE”鍵啟動充電,待顯示“READY”后按確認(rèn)執(zhí)行放電。
放電過程中禁止觸碰設(shè)備及 ShockPod,防止高壓傷害。
電擊結(jié)束后等待屏幕顯示“COMPLETE”,確認(rèn)放電結(jié)束。
取出電擊杯時應(yīng)使用絕緣手套或鑷子,防止靜電殘余。
若使用多脈沖模式,設(shè)定脈沖間隔 3–5 秒。
間隔過短會導(dǎo)致樣品過熱,影響細(xì)胞存活率。
每次脈沖后觀察液面變化,若出現(xiàn)氣泡或液體溢出應(yīng)立即停止。
操作者應(yīng)佩戴絕緣手套和防護眼鏡。
不得穿戴金屬飾品,如戒指、手表等。
實驗臺面不得有液體殘留。
若發(fā)生液體濺入主機,應(yīng)立即切斷電源并擦干。
設(shè)備周圍不得放置易燃物。
若出現(xiàn)異味、異常響聲或煙霧,應(yīng)立即關(guān)閉電源。
禁止非專業(yè)人員拆卸主機或模塊。
放電過程中禁止人員靠近電擊杯開口處。
電源插頭與線纜不得受壓或折疊。
使用完畢后務(wù)必關(guān)閉電源并拔下插頭。
電擊完成后立即將樣品轉(zhuǎn)移至預(yù)溫培養(yǎng)基中恢復(fù)細(xì)胞。
電擊杯用去離子水沖洗干凈并自然晾干。
不得使用強酸堿或有機溶劑清洗電極。
清理儀器表面時應(yīng)用柔軟干布輕擦。
不得讓清潔液進(jìn)入散熱口或電源接口。
關(guān)閉主機電源后等待 10 秒,確保內(nèi)部電容完全放電。
清理完畢后覆蓋防塵罩,避免灰塵積累。
每周檢查 ShockPod 連接線是否老化或松動。
定期清潔風(fēng)扇通風(fēng)口,防止灰塵堵塞。
若風(fēng)扇噪音增大,應(yīng)檢查是否有異物。
每三個月檢查一次電源插頭和保險絲狀態(tài)。
定期檢查主機外殼有無裂紋或變形。
禁止自行拆機維修,如需檢修應(yīng)由廠家技術(shù)人員操作。
若長時間不用,建議每月通電一次運行 5 分鐘,防止電容老化。
避免頻繁開關(guān)機,以免電源模塊受沖擊。
每半年進(jìn)行一次性能校準(zhǔn),包括輸出電壓、時間常數(shù)和電弧檢測靈敏度。
長期不用時應(yīng)存放在干燥通風(fēng)處,避免陽光直射。
環(huán)境溫度應(yīng)控制在 –10–55℃,濕度不超過 90%。
電擊杯、模塊和主機應(yīng)分開放置并使用防潮袋密封保存。
搬運時輕拿輕放,防止震動造成電容損壞。
樣品含鹽量高
導(dǎo)致放電時產(chǎn)生電弧或燒杯現(xiàn)象,應(yīng)更換低離子強度緩沖液。
樣品體積過多
液體溢出易造成短路,應(yīng)嚴(yán)格控制體積。
氣泡未清除
電弧放電會損壞樣品并縮短電極壽命,操作前應(yīng)檢查液面。
未正確接地
可造成儀器漏電或放電不穩(wěn)定,必須檢查地線。
重復(fù)放電過快
電容未完全放電會導(dǎo)致電壓疊加,應(yīng)間隔 10 秒以上。
電擊杯老化
長期使用的杯子導(dǎo)電不均或絕緣性能下降,需及時更換。
高壓線纜彎折
會造成內(nèi)部斷裂或漏電,應(yīng)保持線纜自然彎曲。
誤設(shè)高電壓
超過細(xì)胞承受范圍會導(dǎo)致全部死亡,應(yīng)參考推薦參數(shù)逐步優(yōu)化。
操作中蓋未閉合
設(shè)備無法啟動或自動報警,應(yīng)重新合上蓋。
連續(xù)工作時間過長
設(shè)備過熱會引發(fā)保護停機,應(yīng)每工作 1 小時停機冷卻 10 分鐘。
僅限經(jīng)過培訓(xùn)的人員操作。
新用戶首次使用應(yīng)在有經(jīng)驗者指導(dǎo)下完成。
實驗前應(yīng)熟悉儀器說明、警告標(biāo)識和應(yīng)急措施。
實驗區(qū)應(yīng)配置滅火器、急救箱及絕緣墊。
操作時保持注意力集中,不可同時處理其他儀器。
嚴(yán)禁學(xué)生或?qū)嵙?xí)人員獨立操作高壓部分。
實驗結(jié)束后應(yīng)填寫設(shè)備使用記錄,標(biāo)明操作人、日期、運行情況。
設(shè)備質(zhì)保期為三年,實行只換不修政策。
用戶不得擅自拆開機殼,否則失去保修資格。
設(shè)備發(fā)生故障應(yīng)立即停止使用,并聯(lián)系廠家售后。
在保修期內(nèi)若需運輸返修,應(yīng)使用原包裝材料,防止運輸損壞。
非原廠附件或電擊杯造成的損壞不在保修范圍內(nèi)。
使用不當(dāng)引起的事故或數(shù)據(jù)丟失由操作方自行承擔(dān)。
每次實驗應(yīng)記錄電壓、電容、時間常數(shù)、波形及轉(zhuǎn)染結(jié)果。
保留異常實驗記錄以便分析原因。
不可在操作過程中拔掉 USB 或數(shù)據(jù)線,防止數(shù)據(jù)損壞。
導(dǎo)出數(shù)據(jù)后及時備份到電腦或云端。
刪除舊記錄前應(yīng)確認(rèn)已完成歸檔。
采用穩(wěn)定電源,避免頻繁電壓波動。
保持散熱口清潔,防止灰塵堵塞。
避免連續(xù)長時間高壓放電。
使用完畢后將主機置于常溫環(huán)境中冷卻。
定期進(jìn)行功能檢測與電氣校準(zhǔn)。
發(fā)現(xiàn)異常聲響、震動或輸出波形不穩(wěn)時,立即停止使用。
出現(xiàn)電弧閃光或焦味
立即斷電,拔掉插頭,檢查電擊杯與樣品導(dǎo)電性。
放電后屏幕無響應(yīng)
關(guān)閉電源重新啟動,如仍無顯示應(yīng)聯(lián)系售后。
樣品噴濺
使用紙巾或吸水布擦拭干凈,不可用手直接接觸。
人員觸電輕微
立即斷電并檢查接地狀況,必要時就醫(yī)。
設(shè)備冒煙或起火
使用二氧化碳滅火器滅火,禁止使用水型滅火劑。
實驗前檢查:電源、地線、模塊、杯體、電極均完好。
參數(shù)設(shè)置:依據(jù)細(xì)胞類型選擇合適電壓與時間,不可超限。
安全防護:全程佩戴絕緣手套,避免液體接觸。
放電操作:蓋閉合后啟動,放電結(jié)束后方可取出樣品。
實驗后清理:斷電、放電、清潔、覆蓋、防塵。
記錄保存:完整記錄每次操作數(shù)據(jù),便于重復(fù)與追蹤。
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