激情欧美日韩一区二区,极品少妇hdxx麻豆hdxx,久久自己只精产国品,丝袜老师办公室里做好紧好爽

一、儀器簡介

伯樂Gene Pulser Xcell電穿孔儀是伯樂公司研制的高性能電穿孔系統(tǒng)，專為基因轉(zhuǎn)化、蛋白導(dǎo)入、RNA電轉(zhuǎn)及細(xì)胞融合等實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
設(shè)備采用可控高壓脈沖技術(shù)，使細(xì)胞膜短暫形成可逆性納米孔洞，從而實(shí)現(xiàn)外源分子進(jìn)入細(xì)胞的過程。

主要特點(diǎn)：

• 輸出電壓范圍寬：10–3000 V；

• 支持指數(shù)波與方波兩種模式；

• 電容范圍25–3275 μF，可精確控制時(shí)間常數(shù)；

• 內(nèi)置電弧保護(hù)系統(tǒng)，防止樣品擊穿；

• 參數(shù)可儲(chǔ)存、調(diào)用與復(fù)制，便于重復(fù)實(shí)驗(yàn)；

• 模塊化設(shè)計(jì)，支持細(xì)菌、酵母、植物原生質(zhì)體及動(dòng)物細(xì)胞等多類型實(shí)驗(yàn)；

• 配備安全互鎖系統(tǒng)與溫度保護(hù)裝置。

二、工作原理

電穿孔（Electroporation）是通過施加瞬間高電壓脈沖改變細(xì)胞膜通透性，使帶電分子（DNA、RNA、蛋白質(zhì)）進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的一種物理方法。

原理要點(diǎn)

1. 當(dāng)外加電場強(qiáng)度達(dá)到一定閾值時(shí)，細(xì)胞膜上的磷脂分子重新排列形成暫時(shí)性孔洞；

2. 孔洞形成后，外源物質(zhì)可自由擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞；

3. 移除電場后，膜孔在短時(shí)間內(nèi)自我修復(fù)，保持細(xì)胞活性。

公式表達(dá)：
電場強(qiáng)度 $E=V/d$，其中V為電壓，d為電極間距。
時(shí)間常數(shù) $\tau =RC$，反映放電持續(xù)時(shí)間。
通過調(diào)節(jié)V、R、C三者，可以精確控制穿孔效果與細(xì)胞存活率。

三、儀器結(jié)構(gòu)組成

1. 主機(jī)控制單元（Main Unit）
   控制電壓、電容、電阻及波形輸出，帶有顯示屏與操作面板。

2. 模塊系統(tǒng)（Modules）

• PC模塊（Pulse Controller）：適合指數(shù)波放電（細(xì)菌、酵母、植物細(xì)胞）；

• CE模塊（Capacitor Extender）：用于方波放電（動(dòng)物細(xì)胞）。

3. ShockPod電擊槽
   用于放置電穿孔杯（cuvette），連接高壓輸出端。

4. 顯示面板與按鍵區(qū)
   可設(shè)置電壓、電容、電阻、脈沖次數(shù)等參數(shù)，并實(shí)時(shí)顯示運(yùn)行狀態(tài)。

5. 安全系統(tǒng)
   包括電弧檢測、電極互鎖、防過載及過溫保護(hù)功能。

6. 電源與接地裝置
   提供穩(wěn)定電流，確保安全運(yùn)行。

四、安裝與準(zhǔn)備

1. 安裝環(huán)境要求

• 室溫15–30℃；

• 濕度≤70%，無冷凝；

• 避免陽光直射與強(qiáng)電磁干擾；

• 使用獨(dú)立接地的交流電源（220V，50Hz）；

• 放置在平穩(wěn)、防震、防潮的實(shí)驗(yàn)桌上。

2. 安裝步驟

1. 將主機(jī)放置平穩(wěn)；

2. 將ShockPod電擊槽插入主機(jī)前面接口；

3. 若需方波實(shí)驗(yàn)，連接CE模塊；

4. 插入電源線并接地；

5. 開機(jī)后系統(tǒng)自檢，顯示“System OK”即可使用。

3. 檢查項(xiàng)目

• 電極表面干凈、無氧化；

• 電擊槽蓋可正常閉合；

• 電源指示燈正常亮起；

• 顯示屏參數(shù)清晰。

五、操作流程

（一）樣品準(zhǔn)備

1. 細(xì)胞預(yù)處理

• 使用對數(shù)期活性細(xì)胞；

• 低溫離心，去除培養(yǎng)基鹽分；

• 用無離子甘油或電穿孔緩沖液洗滌三次；

• 保持4℃預(yù)冷，防止電擊升溫。

2. DNA/RNA樣品

• 純度高，OD260/280≈1.8；

• 避免鹽和酒精殘留；

• 濃度一般為1–5 μg/mL。

3. 電擊杯準(zhǔn)備

• 選擇適當(dāng)間距（0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm）；

• 加入40–80 μL混合樣品；

• 避免產(chǎn)生氣泡；

• 保持杯體干凈、干燥。

（二）參數(shù)設(shè)定

根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型調(diào)整電壓、電容、電阻及波形。

設(shè)定方法：

1. 按“Menu”進(jìn)入主菜單；

2. 選擇“Manual”或“Preset”；

3. 輸入電壓、電容、電阻；

4. 選擇脈沖次數(shù)與間隔時(shí)間；

5. 保存方案或直接運(yùn)行。

（三）電擊操作步驟

1. 將裝好樣品的電擊杯放入ShockPod槽中；

2. 關(guān)閉防護(hù)蓋；

3. 按“Pulse”鍵啟動(dòng)；

4. 屏幕顯示電壓、時(shí)間常數(shù)、脈沖曲線；

5. 電擊結(jié)束后，系統(tǒng)自動(dòng)放電；

6. 打開蓋子，取出電擊杯；

7. 立即將樣品轉(zhuǎn)入復(fù)蘇培養(yǎng)基中。

注意： 每次電擊后應(yīng)間隔30秒以上再進(jìn)行下一次操作。