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質(zhì)保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司。

一、前言

伯樂（Bio-Rad）Genepulser Xcell 電穿孔儀是一款高性能的基因?qū)朐O(shè)備，主要用于將外源 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)通過電場作用導(dǎo)入細(xì)胞中，實現(xiàn)基因編輯、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)染。該設(shè)備以其高穩(wěn)定性、精確控制和安全性而廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及生物工程研究。

為了確保設(shè)備運行穩(wěn)定、實驗結(jié)果準(zhǔn)確以及操作安全，制定科學(xué)、規(guī)范的標(biāo)準(zhǔn)操作流程（SOP）至關(guān)重要。該流程覆蓋從開機檢查、樣品準(zhǔn)備、參數(shù)設(shè)置、放電操作到實驗后清潔與數(shù)據(jù)保存的全過程，幫助實驗人員高效、安全地使用 Genepulser Xcell 電穿孔儀，最大限度地發(fā)揮設(shè)備性能。

二、操作前準(zhǔn)備

1. 環(huán)境條件要求

• 溫度范圍：20℃～25℃；高溫可能導(dǎo)致電容效率下降。

• 濕度范圍：≤70%；濕度過高會影響絕緣性能。

• 電源要求：220V±10%，50Hz，接地良好，接地電阻 <1Ω。

• 操作平臺：平穩(wěn)、絕緣、防震，遠(yuǎn)離高磁場與水源。

• 防護設(shè)施：操作人員應(yīng)佩戴防靜電手環(huán)，使用防護眼鏡。

2. 儀器外觀與連接檢查

• 檢查外殼、按鍵、接口是否完好無損；

• 電源線、接地線接觸緊密，無破損；

• 電極接口清潔、無氧化或殘留液體；

• 通風(fēng)口保持暢通，確保散熱正常；

• 確認(rèn)顯示屏亮度正常，無閃爍或死機。

3. 開機前安全檢測

• 打開電源，儀器自動執(zhí)行自檢；

• 檢查界面提示“System OK”或“Ready”；

• 若出現(xiàn)“Arc Detected”或“Ground Error”警告，必須停止使用并排查問題。

三、樣品準(zhǔn)備

1. 細(xì)胞準(zhǔn)備

• 選取對數(shù)生長期的活性細(xì)胞，確保細(xì)胞完整；

• 用無離子緩沖液（如無Ca2?、Mg2?的 HEPES 溶液）洗滌3次以降低導(dǎo)電率；

• 控制細(xì)胞濃度：

• 細(xì)菌樣品約 1×10? 個/mL；

• 哺乳動物細(xì)胞約 1×10? 個/mL；

• 保持細(xì)胞懸液溫度在 4℃，以減輕電穿孔熱效應(yīng)。

2. 樣品液配置

• DNA、RNA 或質(zhì)粒溶液需純度高、濃度適中；

• 推薦 DNA 濃度：50～100 ng/μL；

• 樣品緩沖液導(dǎo)電率應(yīng)小于 5 mS/cm；

• 樣品總體積為電擊杯（Cuvette）容量的 1/10～1/2，常用 40～80 μL。

3. 電擊杯準(zhǔn)備

• 選擇適當(dāng)間距電極（0.1 cm、0.2 cm 或 0.4 cm）；

• 實驗前使用 70% 酒精擦拭并晾干；

• 預(yù)冷至 4℃，防止電穿孔時產(chǎn)生過熱；

• 樣品加入后輕輕拍打底部，排除氣泡。

四、參數(shù)設(shè)置

1. 模式選擇

在主界面“Mode”菜單中選擇相應(yīng)實驗?zāi)Ｊ剑?/p>

• 細(xì)菌轉(zhuǎn)化模式（E. coli Transformation）

• 酵母電轉(zhuǎn)化模式（Yeast Transformation）

• 哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染模式（Mammalian Electroporation）

• 植物原生質(zhì)體模式（Plant Protoplast Mode）

• 電融合模式（Cell Fusion Mode）

• 自定義模式（User Defined Mode）

2. 參數(shù)設(shè)定規(guī)范

• 電壓（V）：依據(jù)樣品類型設(shè)定，一般范圍 100～2500 V；

• 脈沖時間（ms）：通常為 1～10 ms，時間過長會導(dǎo)致細(xì)胞不可逆損傷；

• 電容（μF）：決定能量釋放量，一般 25～1250 μF；

• 電阻（Ω）：控制放電速率，推薦 200～600 Ω；

• 脈沖次數(shù)與間隔時間：多脈沖實驗時應(yīng)設(shè)置 2～5 s 間隔，防止熱累積。

3. 參數(shù)設(shè)置流程

1. 按“Set Parameters”進入設(shè)定界面；

2. 使用旋鈕或觸控面板輸入電壓、電容等數(shù)值；

3. 檢查波形類型（指數(shù)衰減或方波）；

4. 確認(rèn)無誤后按“Save”，系統(tǒng)提示“Parameters Accepted”。

五、放電操作流程

1. 樣品裝載

• 將準(zhǔn)備好的樣品加入電擊杯；

• 確保液面平整、無氣泡；

• 插入電極槽，方向正確并插到底部；

• 合上安全蓋，系統(tǒng)檢測到閉合后顯示“Ready to Pulse”。

2. 電穿孔執(zhí)行

• 按下“START”鍵，系統(tǒng)開始充電；

• 充電指示燈亮起并顯示“Charging”；

• 電容充滿后，設(shè)備自動觸發(fā)放電；

• 顯示屏同步顯示電壓、電流、脈沖時間與能量輸出；

• 放電完成后提示“Pulse Completed”。

3. 實驗后處理

• 立即取出樣品，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至復(fù)蘇培養(yǎng)基；

• 輕輕混勻并放置 10 分鐘，以恢復(fù)細(xì)胞膜完整性；

• 電極槽用蒸餾水和酒精擦拭，保持干燥。

六、安全操作規(guī)范

1. 電氣安全

• 放電前確保接地良好；

• 禁止在設(shè)備運行時觸碰電極；

• 若發(fā)生電弧或異常聲響，立即按“STOP”鍵終止操作；

• 使用穩(wěn)壓電源以防電壓波動損壞電路。

2. 樣品安全

• 避免高鹽濃度樣品，以防電弧放電；

• 不可重復(fù)對同一樣品放電；

• 每次實驗結(jié)束后更換電擊杯；

• 廢液按生物安全要求處理。

3. 人員防護

• 佩戴絕緣手套與防護眼鏡；

• 禁止單手操作設(shè)備；

• 操作時不得有液體濺入儀器內(nèi)部。

七、數(shù)據(jù)記錄與保存

1. 實驗數(shù)據(jù)自動記錄

Genepulser Xcell 自動保存每次放電的關(guān)鍵數(shù)據(jù)：

• 電壓峰值與時間常數(shù)；

• 實測電流曲線；

• 樣品編號與實驗?zāi)Ｊ剑?/p>

• 是否發(fā)生異常放電。

2. 數(shù)據(jù)導(dǎo)出

• 通過 USB 接口導(dǎo)出 CSV 格式文件；

• 文件可導(dǎo)入 Excel 或科研統(tǒng)計軟件進行分析；

• 保存路徑默認(rèn)以日期命名，便于追溯。

3. 紙質(zhì)記錄

實驗人員應(yīng)同步填寫實驗記錄表，內(nèi)容包括：

• 日期、實驗編號；

• 樣品來源與細(xì)胞類型；

• 設(shè)定與實測參數(shù)；

• 結(jié)果與備注信息。

八、日常維護流程

1. 每次實驗后

• 關(guān)閉電源，斷開電極連接；

• 用干布擦拭電極槽與外殼；

• 檢查通風(fēng)口，防止灰塵堵塞；

• 電擊杯徹底清潔并晾干。

2. 每周維護

• 檢查電纜與接口是否松動；

• 測試接地電阻，確保安全；

• 清理電源線與風(fēng)扇出風(fēng)口；

• 運行一次系統(tǒng)自檢并保存報告。

3. 定期維護

• 每 6 個月進行校準(zhǔn)與性能檢測；

• 檢測電容容量與時間常數(shù)精度；

• 檢查電弧抑制功能是否正常；

• 更新軟件版本，優(yōu)化控制算法。

長沙實了個驗儀器制造有限公司提供免費上門檢測與三年保修支持。

九、常見異常與處理

任何設(shè)備異常均應(yīng)記錄并上報，不得私自拆解儀器。

十、操作注意事項

1. 每次實驗前確認(rèn)自檢結(jié)果為“OK”；

2. 放電過程中嚴(yán)禁打開蓋板；

3. 不得使用未經(jīng)廠家認(rèn)證的附件或電極；

4. 長期不用時，應(yīng)斷電并放電電容；

5. 若長時間連續(xù)操作，應(yīng)間隔 10 分鐘冷卻；

6. 避免在潮濕、灰塵多的環(huán)境下運行；

7. 建議每半年進行一次性能評估與調(diào)試。

十一、標(biāo)準(zhǔn)關(guān)機流程

1. 結(jié)束所有操作后，返回主界面；

2. 按“STOP”鍵停止系統(tǒng)運行；

3. 關(guān)閉電源開關(guān)；

4. 拔掉電源插頭與數(shù)據(jù)線；

5. 覆蓋防塵罩并存放于干燥環(huán)境。

遵守關(guān)機流程能有效延長設(shè)備壽命，防止靜電與電容殘壓損傷內(nèi)部電路。

十二、標(biāo)準(zhǔn)化管理與培訓(xùn)要求

• 所有操作人員必須通過培訓(xùn)并考核合格后方可獨立操作；

• 每臺設(shè)備應(yīng)建立獨立檔案，包括出廠編號、維護記錄、操作日志；

• 每次使用均需登記操作人、實驗時間與實驗編號；

• 實驗室應(yīng)定期組織安全與設(shè)備培訓(xùn)，更新操作規(guī)范。

規(guī)范的操作體系不僅提高實驗成功率，還為科研數(shù)據(jù)的真實性提供保障。

十三、總結(jié)

伯樂 Genepulser Xcell 電穿孔儀標(biāo)準(zhǔn)操作流程的制定旨在規(guī)范實驗步驟、減少誤差、保障安全并延長設(shè)備壽命。
從設(shè)備檢查、樣品準(zhǔn)備到參數(shù)設(shè)置與放電執(zhí)行，每個環(huán)節(jié)都需嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)化要求。
通過執(zhí)行本流程，實驗人員能夠?qū)崿F(xiàn)高效、可重復(fù)的基因轉(zhuǎn)化實驗，為科研工作提供可靠技術(shù)支撐。

設(shè)備由長沙實了個驗儀器制造有限公司生產(chǎn)，享受三年質(zhì)保政策——“只換不修”，為用戶提供持續(xù)穩(wěn)定的技術(shù)保障與售后服務(wù)。
規(guī)范的操作流程與高標(biāo)準(zhǔn)的管理制度相結(jié)合，使 Genepulser Xcell 成為實驗室長期可靠的核心設(shè)備。