質(zhì)保3年只換不修,廠家長沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司。
伯樂(Bio-Rad)Genepulser Xcell 電穿孔儀是一款集高精度電場控制、智能脈沖調(diào)節(jié)與多模式轉(zhuǎn)化功能于一體的先進(jìn)生物電轉(zhuǎn)化設(shè)備。它廣泛應(yīng)用于基因?qū)?、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、RNA 干擾、蛋白遞送及細(xì)胞融合等實(shí)驗(yàn),是分子生物學(xué)與細(xì)胞工程研究中的核心儀器之一。
為了確保設(shè)備性能穩(wěn)定、實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠及操作安全,必須嚴(yán)格遵守使用規(guī)范。規(guī)范化操作不僅有助于提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率與存活率,還能延長設(shè)備壽命,防止電弧放電、能量損耗等潛在風(fēng)險(xiǎn)。
本文件系統(tǒng)介紹伯樂 Genepulser Xcell 電穿孔儀的使用規(guī)范,從準(zhǔn)備、操作、維護(hù)到安全注意事項(xiàng),為科研人員提供標(biāo)準(zhǔn)化指導(dǎo),確保設(shè)備發(fā)揮最大效能。
溫度范圍:20℃~25℃;過高溫度可能導(dǎo)致電容放電性能下降。
濕度要求:相對濕度不超過 70%,防止電極或電路板受潮。
電源條件:220V ±10%,50Hz;獨(dú)立供電回路并接地良好,接地電阻小于 1Ω。
操作臺:采用絕緣、防震、防靜電材料制成,表面干凈、平整。
防塵要求:遠(yuǎn)離化學(xué)試劑與高粉塵環(huán)境,保持通風(fēng)良好。
確認(rèn)電源線、接地線完好無損;
檢查電極接口清潔、無氧化;
查看外殼無裂紋、螺釘未松動;
確認(rèn)顯示屏與按鍵正常響應(yīng);
通電后執(zhí)行自檢程序,系統(tǒng)顯示“OK”方可操作。
細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)生長期,并用無離子緩沖液洗滌以降低電導(dǎo)率;
使用低離子強(qiáng)度緩沖液(如無Ca2?、Mg2? 的 HEPES 緩沖液);
DNA 或 RNA 樣品需純度高、濃度適宜,避免含鹽量過高;
預(yù)冷電擊杯(Cuvette)至 4℃,防止溫升導(dǎo)致細(xì)胞死亡;
每次實(shí)驗(yàn)使用新的電擊杯,確保無殘留液體或污染物。
打開電源,等待系統(tǒng)自檢;
屏幕顯示主界面,確認(rèn)狀態(tài)為“Standby”;
檢查接地符號亮起,確保安全連接;
若需外接電腦控制,先連接 USB 通信線,再啟動上位機(jī)軟件。
Genepulser Xcell 具備多種實(shí)驗(yàn)?zāi)J?,可在主界面“Mode”菜單中選擇:
細(xì)菌轉(zhuǎn)化模式:用于 E.coli 等原核細(xì)胞;
酵母電轉(zhuǎn)化模式:針對真核微生物;
哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染模式:適合 CHO、293T、HeLa 等細(xì)胞系;
植物原生質(zhì)體模式:低電壓、多脈沖組合;
電融合模式:用于雜交瘤及胚胎細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn);
自定義模式:用戶可設(shè)置任意參數(shù)組合并保存。
選擇模式后,系統(tǒng)會自動限定參數(shù)范圍以防輸入錯誤。
電壓(V):根據(jù)細(xì)胞類型設(shè)置,一般 100V~2500V;
脈沖時(shí)間(ms):通常為 1~10 ms,時(shí)間過長易造成細(xì)胞膜不可逆損傷;
電容(μF):決定能量儲存大小,范圍 25~1250 μF;
電阻(Ω):調(diào)節(jié)放電速率,常見值為 200~600Ω;
脈沖次數(shù):單次或多次放電,間隔可自定義;
間隔時(shí)間(s):多脈沖實(shí)驗(yàn)中設(shè)置的脈沖間距,避免熱累積效應(yīng)。
進(jìn)入“Set Parameters”界面;
通過旋鈕或觸控面板設(shè)定電壓、電容等參數(shù);
確認(rèn)波形類型(指數(shù)衰減或方波);
按“Save”鍵保存方案;
系統(tǒng)提示“Parameters Accepted”后,返回主界面。
將樣品液體加入預(yù)冷電擊杯中,體積一般為 40~80 μL;
輕輕拍打杯壁,去除氣泡,避免放電時(shí)產(chǎn)生電??;
插入電極槽時(shí)確保方向正確、接觸牢固;
檢查連接線是否插緊,無松動或彎折;
關(guān)閉安全蓋,系統(tǒng)自動檢測蓋鎖狀態(tài),未閉合將禁止啟動。
按下“START”鍵,設(shè)備開始充電并在數(shù)秒后自動放電;
屏幕顯示實(shí)時(shí)電壓、電流和時(shí)間常數(shù);
放電結(jié)束后,顯示“Pulse Completed”。
取出電擊杯,立即將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至復(fù)蘇培養(yǎng)基中;
靜置 10 分鐘后進(jìn)行培養(yǎng);
使用濕巾清潔電極接口,保持干燥。
若出現(xiàn)“Arc Detected”提示,表示發(fā)生電弧,應(yīng)檢查樣品導(dǎo)電性;
不可重復(fù)對同一杯樣品放電;
運(yùn)行期間嚴(yán)禁打開蓋板或觸碰電極。
Genepulser Xcell 可自動記錄每次實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵參數(shù)與波形信息。
記錄內(nèi)容包括:
實(shí)驗(yàn)編號與日期;
電壓、時(shí)間、電流、能量輸出;
樣品編號與模式類型;
是否出現(xiàn)異常放電。
可通過 USB 導(dǎo)出至計(jì)算機(jī),或在屏幕中查看歷史記錄。
研究者應(yīng)同步填寫紙質(zhì)或電子版實(shí)驗(yàn)記錄表,以便分析轉(zhuǎn)化效率和復(fù)現(xiàn)性。
操作人員要求
必須經(jīng)過設(shè)備使用培訓(xùn);
佩戴防靜電手環(huán);
禁止單手操作高壓部分。
電氣安全
確保接地良好;
不得使用損壞的電源線;
禁止在潮濕環(huán)境下開機(jī)。
樣品安全
所有細(xì)胞與試劑必須符合實(shí)驗(yàn)室生物安全等級要求;
廢液應(yīng)按生物危害廢棄物處理;
不得使用易揮發(fā)、易燃液體作為緩沖液。
異常應(yīng)對
若發(fā)生異常聲響或閃光,應(yīng)立即按“STOP”鍵;
斷電后通知管理員檢查;
禁止私自拆開機(jī)殼。
每次實(shí)驗(yàn)后擦拭電極槽,保持清潔;
定期檢查電極接頭是否氧化;
每月清理風(fēng)道與散熱孔;
不使用時(shí)拔掉電源,防止電容長時(shí)間帶電。
建議每 6 個(gè)月進(jìn)行一次校準(zhǔn),內(nèi)容包括:
電壓與時(shí)間常數(shù)校驗(yàn);
電容容量測試;
電弧抑制功能檢測;
系統(tǒng)自檢更新。
長沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司提供上門檢測與軟件升級服務(wù)。
長期不用時(shí),應(yīng)放電電容并蓋上防塵罩;
搬運(yùn)時(shí)避免震動與傾斜,運(yùn)輸溫度保持在 10~35℃;
禁止疊壓或倒置存放。
| 問題 | 可能原因 | 解決方法 |
|---|---|---|
| 無法放電 | 電極未鎖緊或蓋板未閉合 | 重新安裝并檢查安全鎖 |
| 電弧提示 | 樣品導(dǎo)電率過高或有氣泡 | 更換緩沖液并重新裝樣 |
| 電壓不穩(wěn)定 | 電源波動或接地不良 | 使用穩(wěn)壓電源并檢查接地 |
| 屏幕無顯示 | 電源模塊損壞或保險(xiǎn)絲熔斷 | 聯(lián)系廠家售后更換 |
| 轉(zhuǎn)化效率低 | 參數(shù)設(shè)置不當(dāng)或樣品質(zhì)量差 | 優(yōu)化電壓時(shí)間并檢查細(xì)胞活性 |
所有操作異常都應(yīng)詳細(xì)記錄,并根據(jù)日志分析原因,避免重復(fù)錯誤。
建立操作制度
每位實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)遵守實(shí)驗(yàn)室設(shè)備管理制度,填寫使用登記。
操作授權(quán)
僅允許經(jīng)過培訓(xùn)的人員操作,未經(jīng)許可不得修改系統(tǒng)參數(shù)。
設(shè)備使用頻率管理
建議單次連續(xù)使用不超過 2 小時(shí),每運(yùn)行 30 次實(shí)驗(yàn)后休息 10 分鐘以防過熱。
記錄與追溯
每次使用均應(yīng)登記操作人員、實(shí)驗(yàn)編號、時(shí)間與結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)安全會議
定期召開設(shè)備使用與安全復(fù)盤會議,更新操作標(biāo)準(zhǔn)。
科學(xué)規(guī)范的使用不僅能確保安全,還能顯著提升實(shí)驗(yàn)成功率。
在長期實(shí)踐中,遵循以下經(jīng)驗(yàn)可提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率:
調(diào)整電壓與脈沖時(shí)間,使電場強(qiáng)度與細(xì)胞膜電容匹配;
使用新鮮制備的緩沖液,保持低導(dǎo)電性;
控制細(xì)胞濃度在 10? 個(gè)/mL 左右;
采用低溫預(yù)冷法減輕熱損傷;
放電后立即進(jìn)行復(fù)蘇培養(yǎng),延長細(xì)胞修復(fù)時(shí)間;
根據(jù)不同細(xì)胞類型建立專屬參數(shù)模板,實(shí)現(xiàn)重復(fù)穩(wěn)定的結(jié)果。
這些經(jīng)驗(yàn)結(jié)合 Genepulser Xcell 的精密控制系統(tǒng),可實(shí)現(xiàn)高效、可重復(fù)的基因?qū)脒^程。
伯樂 Genepulser Xcell 電穿孔儀作為高端電轉(zhuǎn)化設(shè)備,其使用規(guī)范直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)質(zhì)量與設(shè)備壽命。
通過嚴(yán)格的環(huán)境控制、正確的參數(shù)設(shè)置、標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程以及定期維護(hù),用戶可確保設(shè)備長期穩(wěn)定運(yùn)行,獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
設(shè)備由長沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司制造,提供三年質(zhì)保服務(wù),堅(jiān)持“只換不修”的售后承諾,為科研用戶提供全方位技術(shù)保障。
規(guī)范使用不僅體現(xiàn)科學(xué)精神,更是科研結(jié)果準(zhǔn)確性的重要基礎(chǔ)。遵守操作規(guī)范,既是安全保障,也是實(shí)驗(yàn)成功的第一步。
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